设为首页 - 加入收藏
广告 1000x90
您的当前位置:论文网 > 医学论文 > 药学 > 正文

四种板兰根提取物抗流感病毒作用实验讨论

来源:[db:来源] 编辑:admin 时间:2017-07-26
  板蓝根(Radix Isatidis)为十字花科菘蓝属植物菘蓝(Isatis indigotica)的干燥根,性寒味苦,具有清热解毒、凉血利咽的功效,临床上广泛用于治疗流感、病毒性肝炎、扁桃体炎等细菌、病毒感染性疾病。现代药理学研究表明,板蓝根具有抗菌、抗病毒、抗内毒素、抗癌、抗血小板聚集、提高免疫力等多种药理作用。有关板蓝根抗病毒及作用成分的研究已有许多报道。本研究探讨了板兰根的抗流感病毒作用与其提取物的关系。
  1 材料与方法
  1.1 材料
  1.1.1 药物:板蓝根注射液,山西晋新双鹤药业有限责任公司,批号200709019,1g 生药/2ml/支;板蓝根颗粒,北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂(6110573),1.2 g 生药/g;板兰根中性、酸性、碱性和两性提取物。
  1.1.2 病毒株:流感病毒:流感甲型72-243(H3N2亚型),本院微生物教研室保存。
  1.1.3 鸡胚:9~11d 龄鸡胚,购自天津羽丰种鸡厂。
  1.1.4 ICR 小鼠:15~20g,雌雄各半,购自北京维通利华实验动物技术有限公司(许可证号:SCXK 京2002-001)。1.1.5 试剂:刀斗蛋白A(conA,sigma 公司,批号:C-2010);脂多糖(LPS,sigma 公司,批号:1-2880);MTT(Amresco 公司,批号:0895);RPMI-1640 培养基(GIBCO 公司,批号:1181499);类标准胎牛血清(FCS,美国Hyclone 合资兰州民海生物工程公司,批号:ATM111171),其它常规试剂。
  1.2 方法
  1.2.1 病毒传代及LD50、EID50测定:
  1.2.1.1 病毒传代:毒株接种9 d 龄鸡胚尿囊腔,72 h无菌收获尿囊液,血凝试验确定尿囊液血凝效价,-80℃保存备用。
  1.2.1.2 小鼠LD50测定:ICR 小鼠随机分6 组,每组4只。将收获的病毒(效价1:640)用生理盐水10 倍递次稀释成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6 6 个浓度;乙醚轻度麻醉后,分别滴鼻接种6 组小鼠,每只小鼠滴鼻接种50μl。观察14 d,记录动物死亡情况,按Reed Muench 法计算LD50,得LD50为10-3。
  1.2.1.3 鸡胚EID 测定: 病毒株稀释成10-1、10-2、10-3……10-9不同稀释度,分别接种9 d 龄鸡胚尿囊腔,每胚0.2 ml,每组4 只鸡胚,常规培养3 d,无菌取尿囊液作血凝试验,记录结果,按Reed Muench 法计算半数感染量(EID50)。
  1.2.2 板蓝根4 种提取物在鸡胚内抗流感病毒作用:
  1.2.2.1 对鸡胚的毒性测定:将4 种提取物按5 g 原生药/ml 的原始浓度连续做2 倍稀释至4~5 个浓度,然后接种鸡胚,每只0.2 ml,每组5 只,并设生理盐水对照和四种成分原液阳性组,置37℃培养。常规培养4d,每天记录鸡胚的生长发育、存活情况,以鸡胚全部健康存活96 h 的最大药物浓度为药物的最大无毒剂量。结果显示鸡胚能耐受的药物最大浓度大于5 g 原生药/ml 为无毒类物质。


中教数据库 www.yxlww.cn

中教数据库 版权所有 京ICP备12007566号-2

Top